羅布麻是一種野生植物纖維。它不僅具有良好的服用性能,還具有醫療保健作用,是不可多得的天然醫療保健纖維。本文采用燒瓶振蕩法[1,2],從微生物學角度對羅布麻纖維的抗菌性能做出評價。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 抗菌材料及菌種 羅布麻纖維,由青島大學紡織學院提供;菌種包括金黃色葡萄球菌(NCTC 26025)、銅綠假單胞菌(ATCC27853)、大腸埃希菌(ATCC25922)和白色念珠菌(ATCC10231),由青島大學醫學院菌種室保藏。
1.1.2 試劑與儀器 PBS緩沖液,pH 6.0,本室配制;生理鹽水購自萊陽經濟技術開發區精細化工廠;各種培養基購自杭州天和微生物試劑有限公司;J3034電熱恒溫培養箱,南京市江寧電器儀器廠;SHZ82恒溫振蕩器購自廣州國華電器有限公司。
1.2 方法
1.2.1 羅布麻纖維的處理 將無菌羅布麻纖維及對照樣棉纖維0.75 g,分別加入到含有70 mL無菌PBS的燒瓶中,冷藏待用。同時以僅含有70 mL PBS的燒瓶作為空白對照。
1.2.2 菌懸液的制備 復蘇后的菌種傳代2~3次,培養物接種于新鮮肉湯培養基中,37 ℃恒溫培養箱孵育6 h(白色念珠菌需要在沙保羅肉湯培養基中培養20 h左右),通過比濁,將菌懸液用無菌生理鹽水稀釋至(1.5~2.0)×108CFU/L。
1.2.3 抗菌實驗 采用燒瓶振蕩法。將各種菌懸液分別吸取5 mL加入燒瓶內,搖勻,從各瓶中取0.5 mL用無菌生理鹽水做1∶10,1∶100,1∶1 000稀釋后取適量置入培養皿,瓊脂冷卻至45 ℃傾注,搖勻,待冷卻凝固后,37 ℃孵育18 h,進行菌落計數[3,4]。將加入菌懸液的燒瓶固定于37 ℃電熱恒溫振蕩器上,以200 r/min振蕩2 h,然后重復上述步驟1次。
1.2.4 抑菌率計算 采用公式:μ=(A-B)/A×100%。其中A為試樣振蕩前平均菌落數,B為試樣振蕩后平均菌落數。試驗樣品抑菌率與對照樣品抑菌率之差>26%,即可認定該紡織品具有抗菌作用。
2 結 果
2.1 抑菌率羅布麻纖維試樣的培養皿中菌落數較少,而棉纖維試樣的培養皿中布滿了菌落。羅布麻纖維對幾種常見致病菌的抑菌率見表1。
表1 羅布麻纖維對幾種常見致病菌的抑菌率(略)
2.2 金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌被羅布麻纖維作用前后形態比較電鏡下觀察,羅布麻纖維作用前,細菌生長旺盛,沒有任何細菌殘骸。經過2 h振蕩接觸后,附著在羅布麻纖維上的細菌形態發生了變形或崩裂分解(圖1~4)。
3 討 論
羅布麻纖維含有多種抗菌成分,本身具有良好的抗菌性,廣泛應用于醫療、紡織、保健等各個領域。有關其應用的報道亦有不少。本文結果表明,羅布麻纖維對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌和白色念珠菌的抑菌率分別達到47.7%、69.0%、56.6%和40.1%,提示羅布麻纖維具有較強的抗菌性能。但是羅布麻纖維對革蘭陽性菌和陰性菌的抑制能力是不一樣的,對革蘭陰性菌,尤其是銅綠假單胞菌的作用能力比較強,對革蘭陽性菌的作用能力相對弱一些,這可能與細菌的細胞壁結構有關。革蘭陽性菌的細胞壁較厚(20~80 nm),含有15~50層肽聚糖,大多數還含有大量的磷壁酸,蛋白質含量較少;革蘭陰性菌細胞壁較薄(10~15 nm),含有1~2層肽聚糖,其主要成分是外膜,蛋白質含量多。羅布麻纖維中抗菌物質通過破壞細菌的細胞壁結構,從而抑制細菌生長。本文電鏡照片顯示,羅布麻纖維對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌作用的程度有差別,附著在纖維上的金黃色葡萄球菌有些形狀已經改變,有些已經分解;而附著在纖維上的大腸埃希菌均完全崩裂,沒有完整的細菌存在。本文僅就羅布麻纖維的抗菌性能進行了一些直觀的分析和研究,有關抗菌機制方面的研究,還需要再做進一步的探討。